뉴턴(화학탐구)

1) 네임펜으로 1.5-mL tube와 종이컵에 이름을 쓴다2) 약 10mL의 생리식염수(또는 정수기 물)를 입안에 넣고 격렬하게(볼 안쪽 살을 어금니로 약하게 긁으며) 60초간 가글한 뒤 종이컵에 다시 받는

3) 구강세척액을 마이크로피펫을 사용하여 1.5mL tube에 1400uL 넣는다.(700uL씩 2

4) tube를 microcentrifuge에 무게 중심을 맞추어 넣고 1분간 13,000RPM(최고속)으로 돌린

5) 상등액을 쏟아 제거하고 이 과정(3번~5번)을 같은 튜브에서 반복하여 튜브 바닥의 구강세포 덩어리가 쌀알 크기 정도로 모일 때 까지 약 3~5회 정도 반복한다6) 마지막에는 상등액을 사용하던 마이크로피펫팁을 이용하여 튜브 바닥의 pellet(세포덩이) 주변의 액체를 최대한 제거하여 pellet만 남게한다.7) 튜브에 멸균증류수 30㎕와 Chelex®를 100㎕넣고 마이크로피펫을 50㎕로 맞추고 in and out pipetting(또는 볼텍싱)하여 pellet이 분쇄되도록 한다.8) 튜브 캡을 닫은 후 동동이에 끼워서 boiling water bath(또는 히팅블록)로 100℃ 10분간 끓인다.9) 끓인 후 tube를 약 5초간 볼텍싱하고 microcentrifuge에 1분간 13,000RPM(최고속)으로 원심분리한다.10) 돌리는 동안 최종 DNA용액을 옮길 새 1.5mL 튜브에 이름을 쓴다.11) 새 마이크로피펫팁을 사용하여 맑은 상등액만 준비한 1.5mL tube로 옮긴다. 이때 세포 파편이나 Chelex® 알갱이가 들어가지 않도록 주의한다.12) DNA용액을 사용할 때 까지 아이스나 냉동실에 보관한다.

잘 나왔는데, 스포이드로 빨아들이는 과정에서 제대로 못해 망함...ㅠ